Die Reaktion wurde als pseudo-erster BTK inhibitor Ordnung mit k = 5,5 x 10-5/s charakterisiert. Dieses kinetische Verhalten wie auch die Beobachtung, dass ein größerer Teil des Pt gebunden war, widersprach früheren Ergebnissen, die anhand der Trennung der Pt-Spezies durch Größenausschlusschromatographie erhaltenen worden waren. Eine mögliche Erklärung könnte ein generelles Problem bei der Speziationsanalyse sein: die Stabilität des Komplexes (der Spezies) während der Trennung an stationären Phasen. Da nämlich bei der Kapillarzonenelektrophorese
(CZE) zur Trennung der Pt-Spezies deren unterschiedliche Wanderungsgeschwindigkeiten im elektrischen Feld, entsprechend ihren unterschiedlichen m/z-Werten, genutzt werden anstatt der Interaktion mit der stationären Phase, gilt es als gesichert, dass die Stabilität der Spezies bei der CZE besser gewahrt bleibt als bei der Trennung durch LC (z. B. SEC) [32]. Die abweichenden Ergebnisse der früheren, SEC-basierten Experimente wurden daher in dieser Publikation mit einem Verlust der Bindung während des LEE011 supplier Gelfiltrationsverfahrens erklärt, das zur Abtrennung des ungebundenen Platins verwendet worden war [30]. Die Gruppe um Sanz-Medel [15] verfolgte einen „Bottom-up”-Ansatz bei der Untersuchung der Interaktionen zwischen Pt-Medikamenten und Proteinen.
HSA, Transferrin (TF) und Immunglobulin G (IgG) wurden mit Cisplatin in steigenden Konzentrationen inkubiert und dann mittels HPLC–ICP-MS analysiert. Die Autoren waren in der Lage, innerhalb von 40 min nicht gebundenes Cisplatin, Cisplatin-TF und Cisplatin-HSA nachzuweisen. Im Fall von TF wurden parallel auch die Schwefel- und Eisen-Peaks untersucht. HSA zeigte innerhalb von 24 h völlige Komplexierung, da angenommen wurde, dass 80 % des Medikaments exkretiert oder anderswo gespeichert wurden.
Die berechnete molekulare Stöchiometrie betrug Pt:HSA = 4:1. Transferrin bildete ebenfalls Coproporphyrinogen III oxidase Komplexe mit Pt. Dies war an den parallel eluierenden Peaks für S (TF-Apoprotein), Fe (eisenbeladenes TF) und Pt ersichtlich. Das Addukt wies eine Stöchiometrie von 1:1 auf. Pt ersetzte offenbar nicht das Eisen an seiner spezifischen Bindungsstelle im Transferrin. In einem zweiten Schritt ihres Bottom-up-Ansatzes wurden die Cisplatin-Protein-Interaktionen durch ESI-Q-TOF-MS charakterisiert [15]. Durch diese Experimente konnte zum ersten Mal gezeigt werden, dass Cisplatin zu einer Spaltung von Disulfidbrücken im HSA mit der Möglichkeit einer intermolekularen Quervernetzung des Proteinmoleküls führt. Xie et al. [5] untersuchten die Reaktionsprodukte nach Inkubation von Carboplatin mit HSA und γ-Globulin, da beide Proteine zusammen mehr als 80 % des gesamten Plasmaproteins ausmachen. Innerhalb einiger Tage nahm der Carboplatin-Peak signifikant ab und stattdessen nahm ein neuer Peak zu, der Carboplatin-HSA zugeschrieben wurde.